人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究

doi:10.11816/cn.ni.2016-151490

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题名	人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究
其他题名	Human cytomegalovirus infecting primary Tupaia hepatocytes
作者	林海龙1; 黄乐听2; 陈洁 1; 夏蝉1; 卢朝升1
发表日期	2016
发表期刊	中华医院感染学杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	树鼩原代肝细胞人巨细胞病毒测序
其他关键词	Tupaia ; Primary hepatocytes ; HCMV ; Sequencing detection
摘要	目的研究人巨细胞病毒AD169标准株(HCMV AD169)是否能感染树鼩肝原代细胞,为进一步研究人巨细胞病毒感染树鼩的动物模型研究打下基础。方法 2014年6月起取一只树鼩肝脏,分离并培养树鼩原代肝细胞,利用感染剂量MOI分别为0、0.1和1的HCMV AD169感染肝细胞,在不同时间点(12、24、48、72、120h)检测细胞培养液上清中病毒TCID50滴度,间接免疫荧光法检测肝细胞内HCMV AD169PP65蛋白表达,RT-PCR法检测培养肝细胞内HCMV AD169UL49mRNA,并对PCR结果进行测序并碱基序列比较。结果细胞培养液上清病毒TCID50滴度显示,HCMV AD169能在树鼩肝细胞内复制,间接免疫荧光法可以观察到肝细胞内病毒复制旺盛,RT-PCR和测序分析确证树鼩肝细胞内病毒为HCMV AD169。结论 HCMV AD169能感染体外培养的树鼩原代肝细胞,试实验具有一定的局限性,不能完全说明HCMV AD169感染树鼩动物的成功。
其他摘要	OBJECTIVE To investigate whether HCMV AD169 can infect primary Tupaia hepatocytes,so as to provide reference for analyzing animal model of HCMV infecting primary Tupaia hepatocytes.METHODS In Jun. 2014,the liver of a Tupaia was separated and primary Tupaia hepatocytes were cultured.HCMV AD169with different multiplicity of infection(MOI),including 0,0.1and 1,were used to infect hepatocytes.At different time points(12,24,48,72,120hours),50%tissue culture infection dose(TCID50)of cell culture was detected;indirect immunofluorescence was used to detect protein expression of HCMV AD169PP65in hepatocytes;RT-PCR method was carried out to detect HCMV AD169UL49mRNA in hepatocytes,PCR results were sequenced and compared with base sequence.RESULTS According to TCID50,HCMV AD169 can duplicate in Tupaia hepatocytes. Indirect immunofluorescence showed active duplication of virus in hepatocytes.RT-PCR and sequencing analysis confirmed the virus in Tupaia hepatocytes was HCMV AD169.CONCLUSION HCMV AD169 can infect vitro-cultured Tupaia hepatocytes.But this experiment is limited to some extent,that it can not fully prove the success of HCMV AD169infecting Tupaia hepatocytes.
资助项目	浙江省自然科学基金资助项目（LY13H150005）;浙江省医药卫生科技基金资助项目（2013RCB011）;温州市科技计划基金资助项目（Y20140055）
ISSN	1005-4529
卷号	26 期号:12 页码:2669-2672
DOI	10.11816/cn.ni.2016-151490
页数	4
收录类别	CNKI ; 万方 ; 维普 ; 北大核心 ; PKU ; CSCD ; ISTIC
学科领域	医药、卫生 ; 基础医学
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CSCD记录号	CSCD:5737461
引用统计
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/42354
专题	附属第二医院_儿童感染科附属第二医院_血液内科
作者单位	1.温州医科大学附属第二医院儿童感染科; 2.温州医科大学附属第二医院血液内科
第一作者单位	附属第二医院_儿童感染科
第一作者的第一单位	附属第二医院_儿童感染科
推荐引用方式 GB/T 7714	林海龙,黄乐听,陈洁,等. 人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究[J]. 中华医院感染学杂志,2016,26(12):2669-2672.
APA	林海龙, 黄乐听, 陈洁, 夏蝉, & 卢朝升. (2016). 人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究. 中华医院感染学杂志, 26(12), 2669-2672.
MLA	林海龙,et al."人巨细胞病毒感染树鼩原代肝细胞的研究".中华医院感染学杂志 26.12(2016):2669-2672.

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ZHYY201612011.CAJ（328KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载