用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定

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题名	用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定
其他题名	Expression and characterization of an EGF-IL-18 fusion protein for targeting therapy in insect cells
作者	孟哲峰 ; 彭颖 ; 沈波 ; 吕建新
发表日期	2005-02-20
发表期刊	中国免疫学杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	表皮生长因子-白细胞介素18融合蛋白昆虫细胞肿瘤靶向治疗
摘要	目的 :制备能用于肿瘤靶向治疗的重组表皮生长因子受体干扰序列白细胞介素 18(EGF-IL-18)融合蛋白 ,并鉴定其生物学活性。方法 :利用Bac-to-Bac表达系统在昆虫细胞Sf9中表达融合蛋白 ,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等方法纯化表达产物 ,并以IFN-γ诱导实验和EGFR竞争结合实验初步评价融合蛋白的生物活性。结果 :经SDS-PAGE和Westernblot检测 ,Sf9细胞中表达的重组蛋白与预期的EGF-IL-18融合蛋白分子量一致 ,纯化后融合蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。IFN -γ诱导实验和EGFR竞争结合实验显示 ,该融合蛋白具有肿瘤导向性和抗肿瘤活性。结论 :成功表达并纯化了具有肿瘤导向性的抗肿瘤蛋白———EGF-IL-18融合蛋白 ,该蛋白具有较好的肿瘤导向性和抗肿瘤活性 ,可用于肿瘤的生物治疗研究
其他摘要	Objective;To express and purify a new fusion protein harboring human epidermal growth factor receptor(EGFR) binding domain and Interleukin-18(EH8) , as well as preliminary assay biological activity of recombinant proteins.Methods: Fusion protein was ex-pressed in insect cells Spodoptera frugiperda cell (Sf9) by using Bac-to-Bac system, and an abbreviation purification procedure was used to pu-rify fusion protein. IFN-Yinduetion assay and EGF Receptor competitive test was used to determine fusion protein's biological activity. Results: SDS-PAGE and western blot assay showed that purified EGF-IL-18 fusion protein had high purity in 20 kD as expected and had the same anti-genic specificity as human IL-18. IFN-yinduction assay and EGF Receptor competitive test showed that fusion protein induced production of IFN-7in human PBMC and bound with tumor cells. Conclusion: EGF-IH8 fusion protein has been successfully expressed and purified in insect cells and shows potential to apply in targeting therapy for tumor.
资助项目	浙江省医药卫生重点科技项目（2001ZD007）
ISSN	1000-484X
卷号	21 期号:02 页码:113-115+117
页数	4
收录类别	CNKI ; CSCD ; 万方 ; 北大核心 ; PKU ; ISTIC
学科领域	医药、卫生 ; 基础医学
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CSCD记录号	CSCD:2017297
引用统计
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/86733
专题	其他_附属台州医院（浙江省台州医院）检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_细胞与分子生物医学研究所
作者单位	1.温州医学院附属台州医院 2.温州医学院细胞与分子医学研究所
推荐引用方式 GB/T 7714	孟哲峰,彭颖,沈波,等. 用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定[J]. 中国免疫学杂志,2005,21(02):113-115+117.
APA	孟哲峰, 彭颖, 沈波, & 吕建新. (2005). 用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定. 中国免疫学杂志, 21(02), 113-115+117.
MLA	孟哲峰,et al."用于肿瘤靶向治疗的EGF-IL-18融合蛋白在昆虫细胞中的表达及活性鉴定".中国免疫学杂志 21.02(2005):113-115+117.

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ZMXZ200502007.CAJ（62KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载