表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析

doi:10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002172

科研成果详情

题名	表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析
其他题名	Characterization and Development of Recombinant Vaccinia Viruses Expressing Different Segments of Spike Protein Derived from Human Coronavirus NL-63
作者	赵国霞1,2; 周为民 2; 陆柔剑 2; 王惠娟 2; 赵敏 1,2; 张庭瑛 1,2; 邓瑶 2; 高基民1; 谭文杰1,2
发表日期	2011-05-15
发表期刊	病毒学报影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	人冠状病毒NL63 棘突蛋白受体结合区重组痘苗病毒表达
摘要	HCoV-NL63是新近发现的人冠状病毒,对其外膜糖蛋白-棘突蛋白的表达及功能的研究仍有待深入。本研究利用天坛株痘苗病毒载体,克隆构建可表达HCoV-NL63棘突蛋白四个片段(N端棘突蛋白:S1;C端棘突蛋白:S2;受体结合区大片段:RL;受体结合区小片段:RS)的重组痘苗病毒(vJSC1175-S1;vJSC1175-S2;vJSC1175-RL;vJSC1175-RS),酶切测序证实表达载体构建正确,免疫荧光分析(IFA)各重组痘苗病毒中棘突蛋白不同片段的表达与定位,Western-Blot分析表明各种重组蛋白表达正确。分析结果显示:4种重组蛋白均能有效表达,S1、RL及RS蛋白的荧光主要分布在细胞膜上,而S2蛋白的荧光则主要分布于细胞浆,各个片段的分子量大小与文献报道相同,并可进行正确的翻译修饰(糖基化)。本研究首次采用痘苗病毒天坛株载体构建制备了表达HCoV-NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒,为进一步分析人冠状病毒HCoV-NL63棘突蛋白的结构功能及探索其抗原性和免疫原性奠定了基础。
其他摘要	The spike (S)glycoprotein of HCoV-NL63 is a major target in the development of diagnostic assays and vaccines,but its antigenic and immunogenic properties remain unclear.Four fragments coding spike proteins (S1,S2,RL and RS)from HCoV-NL63 were amplified and cloned into the expression veetor derived from vaccinia virus (Tiantan strain),and recombinant vaccinia viruses expressing four segments of spike proteins were generated (vJSC1175-SI; vJSC1175-S2; vJSC1175-RL; vJSC1175-RS),respectively.Their expression location in cell and level were characterized using indirect immune fluorescence assay (IFA)and Western-Blot,respectively; The expressions of four segments of spike proteins in recom= binant vaccinia viruses were showed at appropriate level and with posttranslational modification (glycocyla= tion),and S1,RL and RS were mainly distributed in the cell membrane,while the S2 was mainly distributed in the cytoplasm.Our results provide a basis for further exploring diagnostic role and vaccine development of different spike segments from HCoV-NL63.
资助项目	国家863课题（2007AA02Z463,2007AA02Z464）;传染病重大专项（2008zx10004-014）;中澳卫生合作项目（CAHHF）EID07
ISSN	1000-8721
卷号	27 期号:03 页码:250-256
DOI	10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002172
页数	7
收录类别	CNKI ; 万方 ; 北大核心 ; PKU ; CSCD ; ISTIC
学科领域	分子生物学 ; 医药、卫生 ; 基础医学
URL	查看原文
CSCD记录号	CSCD:4213431
CNKI分类号	R392
万方分类号	R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）) ; Q78(基因工程（遗传工程）)
引用统计
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/74667
专题	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_病原生物学研究室
作者单位	1.温州医学院医学病毒学研究所; 2.中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程重点实验室
第一作者单位	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_病原生物学研究室
第一作者的第一单位	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_病原生物学研究室
推荐引用方式 GB/T 7714	赵国霞,周为民,陆柔剑,等. 表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析[J]. 病毒学报,2011,27(03):250-256.
APA	赵国霞., 周为民., 陆柔剑., 王惠娟., 赵敏., ... & 谭文杰. (2011). 表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析. 病毒学报, 27(03), 250-256.
MLA	赵国霞,et al."表达人冠状病毒NL63棘突蛋白不同片段的重组痘苗病毒的制备与表达分析".病毒学报 27.03(2011):250-256.

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BDXB201103012.CAJ（1168KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载