融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3（ζ）的构建及真核表达

科研成果详情

题名	融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3（ζ）的构建及真核表达
其他题名	Construction of Fusion Gene anti-erbB2-scFv-Fc-CD28-CD3(ζ) and Expression in Eukaryotic Cell
作者	隋文君; 苏世振; 胡望雄; 李红智; 布立敬
发表日期	2010-10-15
发表期刊	中国细胞生物学学报影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	erbB2 融合基因表达载体肿瘤治疗
摘要	本研究利用SWISS-MODEL预测该融合蛋白的三级结构。利用PCR的方法分别从重组pPIC9k、重组pBullet和pSecTag2B上扩增出3段基因片段,即片段anti-erbB2 scFv(简称A)、片段Fc-CD28-CD3(ζ)(简称B)和信号肽序列(简称S)。利用SOE-PCR将3段序列连接形成融合基因片段S-A-B。经TA克隆扩增及鉴定后,将融合基因片段与逆转录病毒表达载体pLNCX相连构建重组真核表达载体,电转染人淋巴瘤T细胞株Jurkat,G418筛选后用流式细胞术检测融合蛋白稳定表达情况。经预测在anti-erbB2 scFv与Fc基因片段之间不加连接肽的融合蛋白,在三级结构上可形成更佳的功能构象。经PCR、酶切及测序鉴定均证实成功构建重组真核表达载体pLNCX/S-A-B(在A与B基因片段之间不加linker)。经流式细胞术检测,在转染的Jurkat细胞中融合蛋白表达率约为56.17%。本研究应用分子克隆的方法成功地构建了重组真核表达载体pLNCX/anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3(ζ),融合基因能够在淋巴瘤T细胞株中表达,为制备含该融合基因的原代T淋巴细胞,进行erbB2过表达肿瘤的靶向基因治疗研究奠定了实验基础。
资助项目	浙江省自然科学基金（No.Y205171）;温州市科技局对外合作项目（No.H20080059）~~
ISSN	1674-7666
卷号	32 期号:05 页码:702-708
页数	7
收录类别	CNKI ; 万方 ; CSCD ; PKU ; 北大核心 ; ISTIC
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文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/70273
专题	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_细胞生物学与遗传学系
作者单位	温州医学院浙江省重点医学遗传学实验室
第一作者单位	温州医科大学
第一作者的第一单位	温州医科大学
推荐引用方式 GB/T 7714	隋文君,苏世振,胡望雄,等. 融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3（ζ）的构建及真核表达[J]. 中国细胞生物学学报,2010,32(05):702-708.
APA	隋文君, 苏世振, 胡望雄, 李红智, & 布立敬. (2010). 融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3（ζ）的构建及真核表达. 中国细胞生物学学报, 32(05), 702-708.
MLA	隋文君,et al."融合基因anti-erbB2 scFv-Fc-CD28-CD3（ζ）的构建及真核表达".中国细胞生物学学报 32.05(2010):702-708.

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XBZZ201005007.CAJ（1735KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载