重叠延伸PCR法构建β地中海贫血基因突变质粒标准品

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题名	重叠延伸PCR法构建β地中海贫血基因突变质粒标准品
作者	余玲玲1; 冯晶晶 2; 田可港 3; 王慧燕1; 郑晓群1
发表日期	2012-10-10
发表期刊	中国卫生检验杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	β地中海贫血基因突变重叠延伸PCR 定点诱变
摘要	目的:构建含β地中海贫血(简称β地贫)-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒标准品。方法:以含β珠蛋白野生型基因的质粒DNA为模板,采用重叠延伸PCR(Overlap extension PCR,OE-PCR)定点诱变后行TA克隆的方法分别构建含-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒。结果:DNA测序表明:重组质粒1的确含β地贫-28(A>G)突变基因,β珠蛋白-28处的碱基已由A突变成G,其余序列与野生型完全相同;重组质粒2的确含IVS-2-654(C>T)突变基因,β珠蛋白IVS-2-654处的碱基已由C突变成T,其余序列与野生型完全相。成功实现了定点诱变。结论:分别成功地构建了含β地贫-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒标准品,进一步为HRM技术检测β地贫基因突变方法的建立及该病其它基因诊断与筛查技术的研究奠定了实验基础。
资助项目	温州市科技计划资助项目（Y20100036）;浙江省医药卫生科技计划资助项目（2011RCA030）;浙江省公益性技术应用研究计划资助项目（2011C37042）
卷号	22 期号:10 页码:2350-2353
页数	4
收录类别	CNKI ; 北大核心
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文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/67254
专题	第二临床医学院、附属第二医院、育英儿童医院仁济学院_检验与生命科学学部
作者单位	1.温州医学院附属第二医院检验科; 2.浙江省杭州市滨江医院病理科; 3.温州医学院检验与生命科学学院
第一作者单位	温州医科大学
推荐引用方式 GB/T 7714	余玲玲,冯晶晶,田可港,等. 重叠延伸PCR法构建β地中海贫血基因突变质粒标准品[J]. 中国卫生检验杂志,2012,22(10):2350-2353.
APA	余玲玲, 冯晶晶, 田可港, 王慧燕, & 郑晓群. (2012). 重叠延伸PCR法构建β地中海贫血基因突变质粒标准品. 中国卫生检验杂志, 22(10), 2350-2353.
MLA	余玲玲,et al."重叠延伸PCR法构建β地中海贫血基因突变质粒标准品".中国卫生检验杂志 22.10(2012):2350-2353.