温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化

doi:10.13381/j.cnki.cjm.2012.10.002

科研成果详情

题名	温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化
其他题名	Regulation on the Mn-SOD gene promoter in Escherichia coli through temperature
作者	邵海刚 1; 侯亚文 1; 张莹1; 刘奕彦 1; 许海峰 1; 张洪勤2; 应俊2
发表日期	2012-10-30
发表期刊	中国微生态学杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	超氧化物歧化酶启动子重组PCR 红色荧光蛋白报告基因温度
摘要	目的构建大肠埃希菌BL21 Mn-SOD-RFP报告基因载体,并探讨温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子的调控。方法利用重组PCR技术,构建以Mn-SOD启动子调控的红色荧光蛋白(RFP)报告基因载体,将融合基因与T载体连接导入大肠埃希菌中,在不同温度(20、37、40和45℃)培养不同时间(13、20、30、37、44和54 h)后,利用荧光显微镜和荧光光度计观察大肠埃希菌表达RFP的情况。结果正确构建Mn-SOD-RFP融合基因,重组PCR结果与测序结果完全一致;不同温度不同时间诱导后,Mn-SOD启动子在37℃,培养30～37 h表达的红色荧光蛋白最多。结论成功构建该报告基因载体,并完成温度、时间对其调控的优化,为更进一步研究其他因素对SOD基因启动子的调控机制奠定基础。
其他摘要	Objective To construct a vector of Mn-SOD-RFP as a reporter gene in E. coli and investigate how the temperature regulate Mn-SOD gene promoter in BL21 E. coli. Methods Recombinant PCR was used to construct Red Fluorescent Protein (RFP) reporter gene vector regulated by Mn-SOD gene promoter; the fusion gene was ligated with Vector T and transformed into E. coli. Then the expression of REP in BL21 E. coli was observed using fluorescenece microscope and microfluorophtometer after cultivating E. coli at different temperatures (20℃,37℃,40℃,45℃) for different times(13 h, 20 h, 30 h, 37 h, 44 h, 54 h). Results The Mn-SOD-RFP fusion gene was correctly constructed; the result of Recombinant PCR was in accordance with that of sequencing completely; the condition for the optimal RFP expression in E. coli inducted by Mn-SOD gene promoter was at 37℃, after 30 - 37 h of cultivation. Conclusion The reporter gene vector was successfully constructed and the regulation on its promoter was optimized by temperature and time, which provides a foundation and tool further studies on how other factors influence the mechanism of regulation of SOD gene promoter.
资助项目	温州医学院2011年学生科研立项课题（wyx201101077）
ISSN	1005-376X
卷号	24 期号:10 页码:886-888+892
DOI	10.13381/j.cnki.cjm.2012.10.002
页数	4
收录类别	CNKI ; CSCD
学科领域	分子生物学
URL	查看原文
CSCD记录号	CSCD:4685625
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文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/67061
专题	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_生物学实验教学中心
作者单位	1.温州医学院检验医学院与生命科学学院; 2.温州医学院生物学实验教学中心
第一作者单位	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）
第一作者的第一单位	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）
推荐引用方式 GB/T 7714	邵海刚,侯亚文,张莹,等. 温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化[J]. 中国微生态学杂志,2012,24(10):886-888+892.
APA	邵海刚., 侯亚文., 张莹., 刘奕彦., 许海峰., ... & 应俊. (2012). 温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化. 中国微生态学杂志, 24(10), 886-888+892.
MLA	邵海刚,et al."温度对大肠埃希菌Mn-SOD基因启动子调控条件的优化".中国微生态学杂志 24.10(2012):886-888+892.

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ZGWS201210008.CAJ（1187KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载