腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究

doi:10.3969/j.issn.1000-484X.2013.04.019

科研成果详情

题名	腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究
其他题名	Development and study on the technology of double antibodies sandwich ELISA method for quantitative detection of human glandular kallikrein 2
作者	谢克俭1; 姜爱英1; 蔡强军1; 陈映鹤2; 谢辉3
发表日期	2013-04-20
发表期刊	中国免疫学杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	腺激肽释放酶2 酶联免疫分析定量测定方法学
摘要	目的:建立高灵敏度和特异性的腺激肽释放酶2(hk2)酶联免疫吸附试验(ELISA)。方法:以hk2单克隆抗体(hk2mAb)为包被抗体,hk2多克隆抗体(hk2pAb)和辣根过氧化酶(HRP)标记抗IgG为检测抗体,建立检测hk2双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、精密度、准确度和稳定性等方法学进行评价。结果:hk2mAb、hk2pAb和HRP标记IgG的最佳稀释工作浓度分别为1∶100、1∶2 000和1∶8 000。该法线性范围为50～800 ng/L、线性良好(R2=0.99)、灵敏度为28 ng/L、批内和批间CV分别为5.78%和7.56%、平均回收率为99.4%。结论:双抗体夹心ELISA法检测人血清hk2,其敏感性高、特异性强、准确度好,可满足人血清和组织细胞培养液中hk2水平的检测。
其他摘要	Objective:To develop a double antibody sandwich ELISA method for detecting human glandular kallikrein 2(hk_2).Methods:The monoclonal, polyclonal antibody and a HRP-labeled conjugate of another anti-IgG to hk_2 were prepared by ourselves, and a double-antibody-sandwich ELISA method for the detection of serum hk_2 was established, then initially study the research methodology of detection.Results:The best working concentrationof hk_2 mAb,hk_2 pAb and HRP-anti-IgG were 1∶100,1∶2 000 and 1∶8 000,The linear detection was 50 to 800 ng/L(R~2=0.99). The sensitivity was 28 ng/L, and the mean recoveries of samples was 99.4%. while the intra- and inter-assay precisions were 5.78% and 7.56%.Conclusion:Double-antibody sandwich ELISA assay of serum hk_2 has good sensitivity, specificity,accuracy, and it can be used to measure hk_2 level in human plasma or serum and the supernatant of cell culture.
资助项目	浙江省教育厅科研基金资助项目（Y201120586）
ISSN	1000-484X
卷号	29 期号:04 页码:416-418
DOI	10.3969/j.issn.1000-484X.2013.04.019
页数	3
收录类别	CNKI ; 万方 ; 北大核心 ; PKU ; CSCD ; ISTIC
学科领域	医药、卫生 ; 基础医学
URL	查看原文
CSCD记录号	CSCD:4811569
引用统计
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/65663
专题	检验医学院（生命科学学院、生物学实验教学中心）_医学检验诊断学实验教学中心附属第二医院附属第一医院
作者单位	1.温州医学院医学检验诊断学实验教学中心; 2.温州医学院附属二院泌尿外科; 3.温州医学院附属一院泌尿外科
第一作者单位	温州医科大学
第一作者的第一单位	温州医科大学
推荐引用方式 GB/T 7714	谢克俭,姜爱英,蔡强军,等. 腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究[J]. 中国免疫学杂志,2013,29(04):416-418.
APA	谢克俭, 姜爱英, 蔡强军, 陈映鹤, & 谢辉. (2013). 腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究. 中国免疫学杂志, 29(04), 416-418.
MLA	谢克俭,et al."腺激肽释放酶2酶联免疫定量分析法的建立及其方法学研究".中国免疫学杂志 29.04(2013):416-418.

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ZMXZ201304020.CAJ（127KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载