抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定

科研成果详情

题名	抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定
其他题名	Preparation and Identification of Polyclonal Antibody against Small Peptides of β-tubulin of Toxoplasma gondii
作者	毛小勇 1; 华倩倩 2; 李相志 2; 姚丽丽 2; 谭峰2
发表日期	2014-08-30
发表期刊	中国寄生虫学与寄生虫病杂志影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊
关键词	刚地弓形虫 β-微管蛋白多克隆抗体
其他关键词	Toxoplasma gondii ; β-tubulin ; Polyclone antibody
摘要	对弓形虫GT1株、ME49株和人的β微管蛋白的氨基酸序列进行生物信息学分析。根据生物信息学分析结果,人工合成弓形虫β微管蛋白氨基酸序列C端小分子抗原肽。用合成的抗原肽免疫日本大耳兔,每2周免疫1次,0.5 mg/(只·次),共5次。末次免疫后2周,收集兔血清,ELISA检测血清中特异性抗体效价,蛋白质印迹(Western blotting)检测该多克隆抗体与弓形虫RH株、ME49株和PRU株速殖子蛋白的免疫反应。生物信息学分析结果表明,弓形虫GT1株与ME49株的β微管蛋白的氨基酸序列完全一致,与人的β微管蛋白氨基酸序列同源性为98%,差异氨基酸主要集中在C端。经5次免疫后,ELISA证实兔血清中抗体效价为1∶52 800。Western blotting分析结果显示,该多克隆抗体可分别与弓形虫RH株、ME49株和PRU株的β微管蛋白特异性结合。
其他摘要	The amino acid sequences of β-tubulin from Toxoplasma gondii stains (GT1 and ME49) and human were aligned by ClustalW2 software. Based on the alignment result, the C-terminal peptides of β-tubulin of T. gondii were artificially synthesized. Rabbits were immunized with 0.5 mg synthesized peptides for five times at 2-week intervals. Serum samples were collected at the second week after the final immunization, and were analyzed for specific antibodies by ELISA. Finally, the specific-β-tubulin polyclonal antibody was evaluated by Western blotting with the total protein of RH strain, ME49 strain, and PRU strain of T. gondii, respectively. The results showed that β-tubulin of T. gondii stains (GT1 and ME49) shared 100% amino-acid sequence identity, and there was 98% amino acid homology between T. gondii and human. The main variable region was the C-terminus. After the fifth immunization, the titers of polyclonal antibody reached 1 : 52 800. Western blotting result indicated that the specific-β-tubulin polyclonal antibody reacted with β-tubulin in all the three strains (RH, ME49, and PRU), respectively.
资助项目	浙江省自然科学基金（No.LY12H19004,LQ14H190003）~~
ISSN	1000-7423
卷号	32 期号:04 页码:322-323
页数	2
收录类别	CNKI ; 万方 ; 维普 ; 北大核心 ; PKU ; CSCD ; ISTIC
学科领域	医药、卫生 ; 基础医学
URL	查看原文
CSCD记录号	CSCD:5235628
引用统计
文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/51245
专题	其他_附属诸暨医院（诸暨市人民医院）基础医学院（机能实验教学中心）
作者单位	1.温州医科大学附属诸暨医院; 2.温州医科大学基础医学院
第一作者单位	附属诸暨医院（诸暨市人民医院）
第一作者的第一单位	附属诸暨医院（诸暨市人民医院）
推荐引用方式 GB/T 7714	毛小勇,华倩倩,李相志,等. 抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2014,32(04):322-323.
APA	毛小勇, 华倩倩, 李相志, 姚丽丽, & 谭峰. (2014). 抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 32(04), 322-323.
MLA	毛小勇,et al."抗弓形虫β微管蛋白小分子抗原肽多克隆抗体的制备及鉴定".中国寄生虫学与寄生虫病杂志 32.04(2014):322-323.

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ZJSB201404021.CAJ（388KB）	期刊论文	出版稿	开放获取	CC BY-NC-SA	浏览下载