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题名兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定
其他题名Preparation and identification of rabbit anti-cyclin dependent kinase 6(CDK6)antibodies
作者
发表日期2023-08-18
发表期刊细胞与分子免疫学杂志   影响因子和分区
语种中文
原始文献类型学术期刊
关键词细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6) 重组蛋白 基因表达 血清抗体
其他关键词cyclin dependent kinase 6(CDK6) ; recombinant protein ; gene expression ; serum antibody
摘要目的 制备兔抗重组细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体并进行鉴定。方法 合成并构建pET21a(+)-CDK6重组质粒,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法检测蛋白表达;用镍氮川三乙酸(Ni-NTA)亲和层析柱纯化,SDS-PAGE分析;纯化后的CDK6蛋白多部位、多次(隔周)免疫日本大耳白兔,分别于免疫的0、 2、 4、 6周取血,分离血清。采用间接ELISA检测效价,Western blot法、免疫荧光细胞化学染色和免疫组织化学染色法检测其特异性。结果 表达并获得高纯度的CDK6蛋白,制备了兔抗CDK6重组蛋白抗体,其效价达1∶30 000,能特异性识别宫颈癌细胞及宫颈癌组织中表达的CDK6蛋白。结论 成功制备了高效价、特异性强的兔抗CDK6抗体。
资助项目LGF18H160030:浙江省科技厅公益项目
ISSN1007-8738
卷号39期号:08页码:742-747
DOI10.13423/j.cnki.cjcmi.009603
页数6
收录类别CNKI ; 万方 ; 维普 ; 北大核心 ; ISTIC ; CSCD
URL查看原文
CNKI分类号R392-33
万方分类号R392.7(医学免疫学) ; Q344+.13(遗传学分支学科) ; R392-33(医学免疫学)
维普分类号R392.7 ; Q344.13 ; R392-33
CN号61-1304/R
引用统计
文献类型期刊论文
条目标识符https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/186394
专题仁济学院_基础医学部
仁济学院
通讯作者张丽芳
作者单位
1.温州医科大学仁济学院基础医学部解剖教研室;
2.温州医科大学仁济学院分子病毒与免疫研究所
第一作者单位仁济学院_基础医学部
第一作者的第一单位仁济学院_基础医学部
推荐引用方式
GB/T 7714
叶晓鲜,董海艳,王昱,等. 兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定[J]. 细胞与分子免疫学杂志,2023,39(08):742-747.
APA 叶晓鲜., 董海艳., 王昱., 陈争珍., 李军伟., ... & 张丽芳. (2023). 兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定. 细胞与分子免疫学杂志, 39(08), 742-747.
MLA 叶晓鲜,et al."兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定".细胞与分子免疫学杂志 39.08(2023):742-747.

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