哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制

doi:10.16098/j.issn.0529-1356.2023.05.004

科研成果详情

题名	哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制
其他题名	Effect and molecular mechanism of mammalian target of rapamycin complex 2/Akt signaling pathway on 6-hydroxy dopamine-treated SH-SY5Y cell model
作者	李梦一1,2; 吴安婷1,2; 许泽婷1,2; 张庭 1,3; 李军伟 1,2; 周鹏1,2; 崔怀瑞1,2; 孙臣友1,2
发表日期	2023-10-06
发表期刊	解剖学报影响因子和分区
语种	中文
原始文献类型	学术期刊 ; Periodical
关键词	帕金森病哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 PP242 A-443654 免疫荧光 SH-SY5Y细胞系
其他关键词	Parkinson's disease ; Mammalian rapamycin target protein 2 ; PP242 ; A-443654 ; Immunofluorescence ; SH-SY5Y cell line
摘要	目的探讨调控哺乳动物雷帕霉素蛋白复合物2(mTORC2)/Akt信号通路对6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系是否具有保护作用，并阐明其分子作用机制。方法经维甲酸(RA)处理的SH-SY5Y细胞分别给予6-OHDA、mTORC2信号通路抑制剂PP242和激动剂A-443654,通过免疫荧光染色观察各组细胞数目的变化；提取细胞总蛋白进行Western blotting和免疫共沉淀(CoIP)实验，明确mTORC2信号通路关键蛋白的表达水平及其相互作用；采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。同时制备SH-SY5Y与Bv-2细胞系共培养的帕金森病(PD)模型，运用MTT及ELISA方法检测各组细胞活力及培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素β(IL-1β)的含量。结果 6-OHDA损伤的PD细胞模型组酪氨酸羟化酶(TH)/增殖细胞核抗原(PCNA)/Hochest-、TH/5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)-单标或双标阳性细胞数较正常组明显减少，凋亡率升高；Rictor、p-Akt、发育及DNA损伤反应调节蛋白1(REDD1)的表达均上升，且Rictor与p-Akt或REDD1存在相互作用；共培养模型中细胞活力明显降低且上清液中TNF-α和IL-β含量上升。A-443654组随着上述蛋白表达的进一步上调，细胞存活和凋亡以及炎性因子水平均有明显改善，而PP242组则呈现相反的变化。结论 A-443654通过使Akt磷酸化而激活mTORC2信号通路，引起Rictor和REDD1蛋白的表达增加，继而提高细胞存活率并降低凋亡率，促进SH-SY5Y细胞的增殖分化，改善了6-OHDA引起的细胞损伤以及抑制了炎症因子的释放。
资助项目	浙江省自然科学基金(LY22H090004);温州市科技局基础性医疗卫生科技项目(Y20190059)
ISSN	0529-1356
卷号	54 期号:05 页码:521-530
DOI	10.16098/j.issn.0529-1356.2023.05.004
页数	10
收录类别	CNKI ; 万方 ; 维普 ; 北大核心 ; ISTIC ; CSCD
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文献类型	期刊论文
条目标识符	https://kms.wmu.edu.cn/handle/3ETUA0LF/183436
专题	基础医学院（机能实验教学中心）_形态学系_人体解剖学基础医学院（机能实验教学中心）
通讯作者	孙臣友
作者单位	1.温州医科大学基础医学院解剖学教研室; 2.温州医科大学基础医学院神经科学研究所; 3.温州医科大学基础医学院
第一作者单位	基础医学院（机能实验教学中心）_形态学系_人体解剖学; 基础医学院（机能实验教学中心）
第一作者的第一单位	基础医学院（机能实验教学中心）_形态学系_人体解剖学
推荐引用方式 GB/T 7714	李梦一,吴安婷,许泽婷,等. 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制[J]. 解剖学报,2023,54(05):521-530.
APA	李梦一., 吴安婷., 许泽婷., 张庭., 李军伟., ... & 孙臣友. (2023). 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制. 解剖学报, 54(05), 521-530.
MLA	李梦一,et al."哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2/Akt信号通路对6-羟基多巴胺处理的SH-SY5Y细胞模型的作用及分子机制".解剖学报 54.05(2023):521-530.